核酸外切酶 I

产品及特点

Exonuclease I（核酸外切酶 I）是单链特异性3’→5’核酸外切酶，从ssDNA的3’-OH末端分解生成5’-单核苷酸。本酶对单链DNA的特异性非常高，不分解双链DNA及RNA。可通过80℃、15分钟的热处理使之失活，其反应示意图如下：

此产品特点是：

1. PCR反应后残存Primer的分解， 对PCR产物进行测序时，如果在反应体系中残存Primer 和dNTP，测序反应则不能正常进行。使用Exonuclease I可以解多余的Primer；同时使用SAP（CAT#：120403）可降解多余的dNTP，之后不需要对 PCR 产物进行精制，立即可以进行测序反应。

2. 在反应液中去除ssDNA fragment。

活性单位定义

以热变性的小牛胸腺DNA为底物，在37℃、pH9.5的条件下，30分钟内产生

10 nmol的酸可溶性物质所需要的酶量定义为1个活性单位（U）。

纯度

1. 25 U的本酶和1 μg的λDNA-Hind III片段在37℃、pH7.5的条件下反应16小时，DNA的电泳谱带不发生变化。

2. 25 U的本酶和1 μg的Closed circular（RFI）pBR322 DNA 在37℃、pH7.5的条件下反应16小时，DNA的电泳谱带不发生变化。

3. 25 U的本酶和1 μg的M13 mp18 ssDNA在37℃、pH7.5的条件下反应16小时，DNA的电泳谱带不发生变化。

4. 25 U的本酶和1 μg的16S，23S rRNA在37℃、pH7.5的条件下反应16小时，RNA的电泳谱带不发生变化。

Buffer成分

储存Buffer:Tris-HCl（pH7.5） 20 mM，EDTA 0.5 mM，DTT 1 mM，Glycerol 50%。 反应Buffer，10×：Glycine-KOH（pH9.5） 670 mM，DTT10 mM，MgCl2 67 mM。