类器官（organoids）是指一种利用干细胞、祖细胞等在体外培养出的3D细胞培养物并具有一定的空间结构组织类似物。2021年，类器官技术被列为“十四五”国家重点研发专项[1]，作为疾病模型，相比于传统2D疾病模型，类器官在阐明疾病的发展、稳态性和发病机理等与体内环境更加接近，在多领域将发挥重要，诸如细胞治疗、药物研发、基因工程、免疫研究、组织再生等领域。基质胶作为类器官和3D培养的重要载体，在其中发挥着举足轻重的作用。
图：类器官培养发展历史过程[2]
基质胶是从富含胞外基质蛋白EHS小鼠肿瘤中提取取的可溶性基底膜制备物，其主要成分由层粘连蛋白，Ⅳ型胶原，硫酸乙酰肝素蛋白聚糖（HSPG）和巢蛋白等组成，还包如TGF-β、EGF、IGF、FGF等多种生长因子。在室温条件下，基质胶聚合形成具有生物学活性的三维基质，能模拟体内细胞基底膜的结构、组成、物理特性和功能，有利于体外细胞的培养和分化。
翌圣生物开发生产的CeturegelTM Matrix基质胶不含LDEV（乳酸脱氢酶增高病毒），超低内毒素含量，包括基本浓度、高浓度、低生长因子和干细胞和类器官专用不同类型的基质胶。
安全性高：不含LDEV（乳酸脱氢酶增高病毒）
浓度多样性：浓度范围在8~20 mg/ml之间
批次稳定性好：严格生产质检过程保证批次间性能稳定
低内毒素：内毒素含量<4 EU/ml
污染物检测： 经检测无支原体和细菌、真菌残留
单批产量高：单批产量在L级别以上
兼容性好：可与任何类型的细胞培养基兼容
凝胶制备方法
1）基质胶融化后，用预冷的枪头混匀基质胶。
2）将需要使用的培养板置于冰上，然后将培养的细胞与基质胶混合，用遇冷的枪头使细胞悬浮均匀。按照150-200 μL/cm2生长面积的浓度加入基质胶制备3D培养使用的凝胶，详见表1。
3）在37℃放置30min，此时即可加入细胞培养液。
图：3D细胞及类器官培养过程
表1：3D细胞培养基质胶使用参考：
|
培养板（皿）类型 |
细胞培养面积（cm2） |
推荐量(浓度≥3 mg/mL)* |
|
6孔板 |
9.6 |
200 μL/cm2 |
|
12孔板 |
4.5 |
180 μL/cm2 |
|
24孔板 |
2.0 |
180 μL/cm2 |
|
96孔板 |
0.32 |
160 μL/cm2 |
|
35mm培养皿 |
11.78 |
200 μL/cm2 |
|
100mm培养皿 |
58.95 |
200 μL/cm2 |
注：不同批次基质胶有一定的浓度差异，推荐量仅供参考
1、拿到的基质有色差的变化（淡黄色到深红色）是什么原因？
对于含酚红的基质胶主要原因是由于酚红和碳酸氢盐与CO2作用引起的，但是与5％CO2平衡后色差即会减少。冻融后，轻轻摇晃试剂瓶使基质胶分散均匀。
2、基质胶的操作要注意哪些事项？
所有操作需在无菌环境下进行，应使用预冷的器材以保证基质胶正常操作。
3、基质胶的如何分装冻存使用？
可将冻融后的CeturegelTM Matrix基质胶分装在多个冻存管，冻存管需预冷，分装后迅速冷冻并保存，避免多次冻融。
|
产品类型 |
产品名称 |
产品编号 |
规格 |
|
基本浓度 |
40183ES08/10 |
5/10 mL |
|
|
CeturegelTM Matrix Phenol Red-Free，LDEV-Free 基质胶 |
40184ES08/10 |
5/10 mL |
|
|
低生长因子 |
CeturegelTM Matrix GFR，LDEV-Free 基质胶 |
40185ES08/10 |
5/10 mL |
|
CeturegelTM Matrix GFR， Phenol Red-Free，LDEV-Free 基质胶 |
40186ES08/10 |
5/10 mL |
|
|
高浓度 |
CeturegelTM Matrix High Concentration，LDEV-Free 基质胶 |
40187ES08/10 |
5/10 mL |
|
CeturegelTM Matrix High Concentration，Phenol Red-Free，LDEV-Free 基质胶 |
40188ES08/10 |
5/10 mL |
|
|
CeturegelTM Matrix High Concentration，GFR，LDEV-Free
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